本技术涉及畜牧养殖技术,特别是一种牛CXXC1蛋白表达抑制剂用于制备抑制结核分支杆菌的产品。实验证实,CXXC1蛋白的干扰能有效抑制结核分支杆菌的生存。
背景技术
牛结核病是一种主要由牛分支杆菌引起的慢性消耗性人畜共患传染病,造成养牛业重大经济损失并严重威胁公共卫生安全。奶牛结核病已成为影响我国养牛业可持续发展的关键问题,而奶牛结核病抗性基因的发掘应用是抗结核病奶牛育种的重要基础。
Coronin-1A,是由coro1a基因编码的一种广泛表达于真核细胞中的含有色氨酸/天冬氨酸的外壳蛋白,在结核分支杆菌感染后coro1a的转录及表达水平显著升高。结核分支杆菌滞留Coronin-1A在吞噬体上防止吞噬体与溶酶体融合,从而逃避宿主细胞对结核分支杆菌的清除。coro1a的缺失会显著提高宿主细胞的抗结核分支杆菌感染能力。因此靶向抑制coro1a的表达可作为培育抗结核病奶牛的潜在策略。
目前文献报道完全敲除coro1a会造小鼠成幼稚T细胞存活能力下降以及中枢神经系统的损伤,此外基于coro1a本身改造又会存在巨噬细胞内吞途径改变等问题。不改动coro1a本身,而是靶向抑制调控coro1a表达途径可作为新的策略,因此寻找调控coro1a表达的关键序列是目前亟需解决的问题。
CXXC1是以coro1a的启动子区域作为探针,通过DNA-pull down技术,从结核分支杆菌感染后的细胞中筛选出的与coro1a启动子区域特异性结合的蛋白之一。该蛋白质作为转录激活剂,通过其CXXC结构域特异性结合非甲基化CpG基序;是SETD1复合物的组成部分,调节基因表达,对脊椎动物发育至关重要。因此探究CXXC1蛋白在调控coro1a基因表达的作用及作用的关键序列,可为后续通过靶向降低coro1a的表达及抗结核病奶牛育种提供潜在靶点。
实现思路