本技术突破生物分子工程界限,专注于开发一种能够特异性识别天然CRP的DNA适配体。该适配体至少包含以下序列之一:(1)SE。
背景技术
适配体(Aptamers)是一类特有的单链寡核苷酸(DNA或RNA),它们能够通过特定的三维构象与目标分子(靶标)特异性结合;适配体的筛选主要通过系统性进化的配体指数富集(Systematic Evolution ofLigands by Exponential enrichment,SELEX)技术实现。与传统的抗体相比,适配体具备诸多优势,例如筛选过程简便、可通过化学方法合成、易于修饰、成本相对较低、生物相容性好、长期储存稳定性高等。适配体的靶标范围广泛,包括但不限于金属离子、小分子、多肽、蛋白质等,甚至可以是完整的病毒颗粒或细胞。凭借这些特性,适配体在靶标的检测与纯化、疾病的诊断、成像以及药物递送等方面展现出巨大的应用潜力。
C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是一种急性期反应蛋白,由五个相同的亚基共价键连接形成盘状的五聚体结构,主要在肝脏合成。CRP的血浆浓度能在炎症或组织损伤后的48小时内从基础水平的约1μg/mL迅速升高至1000倍以上。因其与炎症的相关性,CRP常被用作感染、组织损伤及某些炎症性疾病进展的生物标志物,尤其是在心血管疾病的预测和评估中备受关注。此外,CRP不仅是一个生物标志物,还在固有免疫和适应性免疫的调节中发挥作用,参与炎症相关疾病的发生,例如心血管疾病、自身免疫病、感染、组织损伤、神经系统疾病等。CRP在肝脏合成后以五聚体形式存在于血液中,被称为天然CRP(nCRP)。在炎症环境中,nCRP可以不可逆地解离为单体CRP(monomeric CRP,mCRP)。现有研究表明,nCRP向mCRP的转变是CRP功能调节的关键,这一变构过程在炎症反应中起到精确调控的作用。而目前nCRP的检测主要依赖于高成本的抗体方法,且不够灵敏、简便。
因此,现有技术还有待于改进和发展。
实现思路