本技术涉及组织保存领域,介绍了一种毛囊的玻璃化保存及恢复技术。该技术包含保存和恢复两个阶段,保存阶段涉及将毛囊浸泡在平衡液中后取出,并进一步浸泡于含有保存液的保存溶液中。
背景技术
雄激素源性脱发(Androgenic alopecia,AGA)是世界上最常见的脱发疾病,在我国有超过2亿患者,主要表现为额部、顶部毛囊的渐进性微型化直至脱落,最终导致秃发。由于药物治疗(非那雄胺和米诺地尔)存在一定副作用、有效率不足及需终生用药等问题,自体毛发移植术已成为解决AGA所致秃发外观及重建前额发际线的最有效治疗手段。
但是,患者未植发区域的毛囊仍会随着时间的推移而脱落,10~20年后需再次移植以改善外形。再次毛发移植时,一方面,疾病进展导致的大面积头发缺失将导致供区毛囊数量不足。另一方面,年龄增长伴随着毛囊衰老,导致移植后的毛囊存活率低。对此,有学者提出一种设想:在高风险脱发人群年轻时提取并玻璃化冷冻保存尚未微型化额部毛囊可增加毛囊供体数量;此外,为年长患者移植用其年轻时储存的优质毛囊,可提高移植后的毛囊存活率。因此,提供一种适用于毛囊的冷冻保存方案可以解决自体毛发移植术面临的衰老毛囊移植存活率低和供区毛囊数量不足的问题。
然而,毛囊是一种多胚层、多种类细胞构成的微器官,其结构复杂性会限制冷冻保护剂(CPA)的渗透,且不同细胞对CPA的敏感性差异大,因此,毛囊的冻存难度远高于对单一细胞。据公开的国内外资料显示,目前仅有1项专利涉及毛囊冻存领域,其提供了一种毛囊玻璃化冻存液(发明专利CN114946829A),但存在以下缺陷:1)其在冷冻保存过程中仅能维持毛囊的细胞活性,复苏后的毛囊可用于提取毛乳头细胞、真皮鞘细胞及外根鞘细胞,但是毛囊的组织活性和结构功能完整性被破坏,复苏后的毛囊无法正常生长和用于毛发移植。2)该专利仅公开了冻存液的成分,并未提及毛囊的冻存和复苏方法。3)其成分含有10%的胎牛血清,不仅存在成分不明的异种免疫源,在临床应用过程中会存在潜在的安全性风险。并且有研究表明,含血清的培养基会抑制毛囊体外培养的活性,可能是由于血清中含有转化生长因子和具有某些特定作用的分子。
综上所述,目前尚无适用于毛囊的冻存和复苏方法,且现有毛囊冻存液不能维持毛囊完整的组织结构和功能。因此,迫切需要建立一种能够维持毛囊组织结构和功能完整性的冻存和复苏方法,使毛囊经过长期保存后,不仅可以用于细胞提取,且能够正常生长,以满足毛发移植手术的需求。
实现思路