本技术涉及国光苹果的再生培养领域，旨在提供一种高效的国光苹果离体再生培养方法。该方法包括以下步骤：(1)将国光苹果叶片接种至诱导再生培养基；(2)在黑暗条件下进行培养。该技术有助于提高国光苹果的繁殖效率，为苹果种植提供新的繁殖途径。
背景技术
苹果(Malus domestica)，蔷薇科苹果属植物，是世界上重要的果树树种之一。‘国光’苹果是重要的苹果品种之一，起源于17世纪末期，由“Caleb Ralls”和“Edmund CharlesGenet”在美国弗吉尼亚州果园里选育，英文名“Ralls Genet”由此而来，又名“Ralls”或者“Rallsjenet”。‘国光’苹果的果个小，果皮黄绿色带有红晕，有红色或淡粉色条纹，果肉淡黄，肉质细嫩，口感清脆酸甜，贮藏一段时间后风味更佳。‘国光’苹果具有丰产、晚熟、抗逆性强、极耐贮运、无采前落果、更新易、寿命长以及兼具鲜食和宜加工等优点。‘国光’虽然品种古老，但其独特的风味和耐贮性，仍然受到消费者的喜爱。
‘国光’苹果不仅是部分地区的主栽品种，还是苹果杂交育种的骨干亲本。具有抗旱抗寒、抗抽条、抗倒伏能力以及早果性强等优点，SH系列矮化砧就是以‘国光’为亲本杂交而来，SH系列苹果矮化砧的育成，是苹果矮化砧木的突破。除了在矮化砧木上的应用，近30年来，‘国光’作为亲本在育种过程中发挥了重要作用。以‘国光’为母本或父本杂交培育出了‘富士’、‘新苹1号’、‘甜国光’、‘燕山红’和‘碣石红’等多个优质耐储存的晚熟新品种。为加强‘国光’苹果的种质创新与保存利用，亟需建立‘国光’再生体系，不仅有利于促进‘国光’苹果育种的进程，同时能够提高常规育种的效率，在生产上有很大的应用价值，促进苹果产业健康快速发展。
‘国光’苹果历史悠久，具有抗逆性强、产量高、极耐贮运、无采前落果、寿命长以及遗传传递力强等优点，在新品种和矮化砧木育种方面有着广泛的应用。金冠苹果全基因组序列的发表促进了苹果分子育种的发展，弥补了传统育种的不足，但苹果分子育种中遗传转化效率低，极大地限制其发展。
离体再生是体细胞诱变、遗传转化以及无性系变异的基础，在创制新种质、培育突破性新品种中发挥重要作用。目前常见苹果品种的遗传转化效率低的问题尚未解决，尤其是主栽品种。要提高苹果遗传转化效率，首先要提高苹果离体再生效率。目前研究尚不能明确苹果叶片再生的分子机理，而苹果叶片再生与基因型密切相关，虽然嘎啦苹果叶片离体再生优于其他品种，但因为遗传背景差异大，无法直接在嘎啦苹果上做基因编辑等生物育种。
为了能高效地融合现代生物技术，围绕如何更有效地利用‘国光’这一珍贵的种质资源开展研究，建立‘国光’无菌苗和离体再生的技术体系，以期通过组织培养、现代分子生物学等育种技术，为‘国光’苹果的创新利用提供新方法。
实现思路