本技术涉及一种新型双光子显微镜活体成像小鼠脊髓固定装置,旨在提高活体成像研究的稳定性和精确度。该装置由底座和支撑组件构成,支撑组件包含两组对称设置的支撑组,用于固定小鼠脊髓,确保成像过程中的稳定性。
背景技术
近年来,双光子显微镜在医学领域得了到广泛应用。双光子显微镜因其非线性激发特性以及使用红外波段的超快激光作为光源,与共聚焦显微镜相比具有更大的成像穿透深度,而且光漂白性小、光毒性小,被广泛应用于活体组织成像。尤其是长工作距离红外高透过率水浸物镜的应用,进一步提高了成像的分辨率和成像深度,为活体组织的细胞水平功能研究提供了有效的方法。
小鼠是最常用的实验动物之一,尤其被广泛应用于基因工程研究。研究者使用基因工程小鼠,借助荧光报告基因,或光遗传学调控结合钙成像技术,通过双光子显微镜活体成像,为神经生物学的研究开发了有效途径。近年来,利用双光子显微镜活体成像技术,人们在对大脑的研究中已获得许多成果,对神经网络结构和功能有了更深入的认识。脊髓是中枢神经系统的重要组成部分。脊髓的活体成像对触觉、痛觉、痒觉、本体感觉、运动以及运动节律等的研究具有重要的意义。然而小鼠脊柱较小,且活动度较大、椎骨形状不规则,这给小鼠脊髓的固定带来了困难。传统的小鼠脊髓固定方法通过夹持椎骨的棘突,或通过卡嵌横突与乳突之间的凹陷来对脊髓实施固定。对于夹持棘突的固定方式,在具体操作中棘突容易被夹断,且难以进行左右调平。而对于卡嵌横突与乳突之间凹陷的固定方式,因不能去除横突与乳突,导致不能充分暴露脊髓,难以实现对双光子显微镜水浸物镜的应用;
例如公开号为CN104287865A的一种动物脊髓活体成像固定观察装置由底板、左侧移动调节装置、右侧移动调节装置和植入式观察窗组成,左侧移动调节装置、右侧移动调节装置通过螺钉固接在底板上,植入式观察窗通过其V型架上的矩形孔与左侧移动调节装置、右侧移动调节装置上的水平定位滑块的矩形凸起插合定位。该发明通过植入式观察窗对脊髓进行固定,虽然有利于术后双光子脊髓成像的动态观测,但不能对脊髓固定后的观察面进行调平,且难以在观察窗中承载水介质,限制了对双光子显微镜水浸物镜的使用。
实现思路