本技术涉及一种培育稳定表达Cas9-gfp融合蛋白的二化性家蚕新品种的方法及其应用。该方法基于多化性家蚕品种Nistari-Ca,通过特定育种技术,成功培育出能够稳定表达Cas9-gfp融合蛋白的二化性家蚕品种。该品种在基因编辑和生物技术领域具有重要应用价值。
背景技术
昆虫滞育,是昆虫在长期进化过程中形成的一种响应温度和光周期等季节性环境变化的生态适应策略。滞育昆虫常表现出生长停滞和脂肪积累,这对其抵御冬季低温、夏季高温和食物匮乏等不利环境意义重大。因此,利用滞育特性,很多农林害虫得以在严酷环境中延续种群,这成为害虫爆发的一个重要原因。家蚕作为鳞翅目模式昆虫,是典型的卵滞育型昆虫,研究家蚕滞育生理及分子调控机制,不仅对理解昆虫季节性适应具有重要的科学意义,而且为发展基于滞育调控的害虫绿色防控技术提供了理论依据。
目前,基于CRISPR/Cas9的家蚕基因编辑技术已经广泛应用于基因功能、遗传改良和创新素材创制等研究,特别是构建了表达Cas9-gfp的转基因家蚕品系,使得基因编辑的家蚕筛选可视化。但Cas9-gfp的表达载体为无滞育期多化性家蚕品系Nistari,该品系不仅个体小、茧层率低,丝量少,与生产上使用的二化性品种有很大的差距,而且没有滞育期,无法应用于二化性家蚕滞育调控分子机制相关研究。
实现思路