本技术介绍了一种创新的高压脉冲电场技术,用于制备细胞外膜囊泡。该方法首先将活体肿瘤组织制成单细胞悬液,随后应用单极性高压脉冲电场处理,以诱导细胞外膜形成囊泡。
背景技术
细胞外膜(plasmalemma,又称细胞质膜或细胞膜)包裹着细胞内的原生质团,维持细胞内环境相对稳定。一些寡聚糖或多糖在细胞外膜的非细胞质侧以共价键的形式与膜脂质或蛋白质结合,形成糖脂和糖蛋白,在细胞外膜的外表面形成细胞外被(cell coat)。生理条件下人体细胞外被的寡聚糖或多糖通常携带负电荷,可以避免细胞在循环系统中被同样携带负电荷的内皮细胞的外被黏连,进而避免被内皮细胞清除或大量吸附在管道内皮细胞表面堵塞管道系统。
构成细胞外被上的特异性的排序的寡聚糖或多糖的单糖序列,可成为被其他细胞或蛋白质识别的抗原决定簇(Antigenic determinant),也能与递质或激素等结合实现特定功能。细胞外膜表面的分化簇(cluster of differentiation)是不同阶段出现在细胞膜表面的糖蛋白或蛋白质,不仅可作为表面标志用于细胞的鉴定和分离,还广泛参与细胞的生长、成熟、分化、发育、迁移、激活。抗原决定簇或分化簇参与构成细胞外膜上的抗原分子或免疫信号分子。
细胞的生物膜系统包括细胞外膜和细胞内膜系统,内膜系统包括内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体、分泌泡和外泌体等细胞器的包被膜,内膜系统表面没有细胞外被。
以往的研究中往往将细胞团块或组织样本机械研磨或将细胞进行低渗、超声或反复冻融处理以获取细胞生物膜碎片,由细胞生物膜碎片制备细胞膜衍生囊泡,作为载体递送小分子物质或核酸序列,用于肿瘤等疾病的治疗。
目前制备细胞膜外膜囊泡的方法尚未见报道。
实现思路