本技术提供了一种利用双荧光素酶报告系统来检测昆虫dsRNA降解酶活性的新方法,属于生物医药技术领域。该方法通过将昆虫dsRNA降解酶基因克隆至pAc5.1载体,实现对酶活性的准确测定。
背景技术
RNA干扰技术现已广泛应用于医疗、农业等领域,被称为第四代杀虫剂的核心技术。但是在该技术应用于害虫防治领域时遇到了最重要的限制因素即昆虫的dsRNA降解酶。因此,检测昆虫的dsRNA降解酶活性很有必要。在以往研究或应用中,检测dsRNA降解酶活性主要是通过体外表达并纯化蛋白质,之后进行体外降解,最后通过电泳检测,此方法操作复杂且周期长,结果也只可以定性而不可以定量。因此急需构建快速活性筛选体系,快速准确地检测昆虫dsRNA降解酶的活性。
实现思路