本技术涉及一种从浙江产金线莲中提取的多糖及其在软骨损伤修复药物中的应用。通过热水提取法获得粗多糖AZJP,并利用阴离子交换柱DEAE-Cellulose进行纯化,以制备高效的软骨损伤修复药物。
背景技术
骨关节炎是一种软骨退行性疾病,主要影响中老年人群,以软骨损伤为特征。目前认为,骨关节炎的发病机制通常伴随软骨成分变化,以及软骨对物理破坏力敏感性的增加,软骨逐渐被侵蚀并失去其完整性。临床研究表明,长期使用糖皮质激素地塞米松(Dex)会增加患者罹患骨关节炎的可能性,甚至会加速已确诊骨关节炎患者的疾病进程。因此,需要进一步研究能够替代地塞米松且安全有效的关节软骨修复药物。
天然来源的多糖是一类无毒和安全的物质,可能含有一些具有骨关节损伤修复的多糖成分。多糖的分离纯化比较复杂,特别是要分离出均一多糖较难,一般需要经过工艺的反复优化。此外,多糖的活性与其结构特征密切相关,包括分子量、糖残基、支化程度和支链构象等。浙产金线莲分布于浙江金华地区,民间记载其常被用于治疗消化系统疾病,如胃痛、肠胃炎等。此外,浙产金线莲还被认为有清热解毒的功效,常用于治疗咽喉肿痛、皮肤湿疹和疮疖等症状。因其对调节免疫、抗疲劳等方面的潜在功效,浙产金线莲也逐渐被认为是一种滋补药材。近年来,现代药理研究发现浙产金线莲具有保肝,降糖,抗炎等活性。然而,对于浙产金线莲多糖的分离和结构鉴定研究至今未见报道。
斑马鱼的基因组与人类基因组有约70%的相似性,且大约84%的人类致病基因在斑马鱼中都有同源基因。因此,许多遗传疾病的致病机制在斑马鱼中可以有效再现。通过基因编辑技术(如CRISPR/Cas9),可以在斑马鱼中敲除或突变特定基因,以模拟人类疾病,比如软骨损伤。
本发明通过优化提取分离工艺条件和参数,从浙产金线莲中纯化出4种新型的均一多糖,采用NMR、IR、GC-MS等多种手段进行结构表征,在转基因斑马鱼模型上对4种金线莲均一多糖的软骨损伤修复作用进行评价,效果均显著优于阳性药阿仑膦酸钠,可以用于软骨损伤修复药物的制备。
实现思路