本技术介绍了一种新型乙肝疫苗,该疫苗基于重组mRNA和DNA分子,旨在通过激发体液免疫和T细胞免疫的双重作用来对抗乙肝病毒。该疫苗包含药物组合物,为乙肝治疗提供了一种有效的新方法。
背景技术
乙型肝炎是世界性公共卫生问题目前临床上的治疗药物包括干扰素和核苷(酸)类似物,可有效抑制HBV转录或复制,但无法彻底清除HBV,且存在治疗响应率低或抗原阴转率低等问题,难以实现乙型肝炎治愈。
大多数慢乙肝患者是由母婴传播或1周岁前感染导致,病毒长期潜伏导致免疫抑制分子过表达,共刺激分子缺失或Treg细胞水平的异常升高导致免疫机体的抗病毒免疫处于耗竭状态,导致病毒特异性免疫无应答。因此,激活固有免疫或适应性免疫应答,诱导T细胞和B细胞抗病毒免疫,是乙肝治愈的新策略。
mRNA疫苗技术可以作为快速灵活的技术平台。随着化学修饰mRNA和纳米脂质载体技术的发展和成熟,mRNA在多种病毒疫苗研发中的优势愈发凸显。其中新冠mRNA疫苗因其在有效性和安全性方面的卓越表现预示该技术在疫苗领域具有良好前景。由于免疫反应的特异性,靶抗原表位序列(包括B细胞表位和T细胞表位)直接决定了免疫反应的种类。鉴于B细胞免疫和T细胞免疫都在HBV病毒的清除中不可或缺,尽可能去选择合适的免疫原性片段,是mRNA疫苗设计的关键一步。
申请公布号为CN114903987A的文件公开了一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物及其制备方法和应用,根据IL-21基因制备IL-21mRNA,再将IL-21mRNA与脂质混合,制得LNP-IL-21。能够有效诱导体内CD8T细胞免疫和体液免疫。其以鼠源基因IL-21编码IL-21蛋白,并采用1-甲基假UTP来取代UTP、加帽结构来提高IL-21mRNA的翻译效率,但是最后验证得到的IL-21蛋白表达,依旧具有转染时间长、表达效率不高的缺陷。
真核生物mRNA的UTR上存在大量的顺式元件和特殊结构,与多种特定的RNA结合蛋白(RBP)互作并进而招募其他蛋白形成复合物,帮助细胞根据不同的信号通路对mRNA的翻译进行精密调控。为了最大程度的提高mRNA疫苗的翻译效率和稳定性,本发明在优化序列SFORF的基础上,还对非编码区(5’UTR和3’UTR)进行了筛选和优化,能在相同接种量的条件下翻译出更多mRNA,发挥更大的生物学效应。
实现思路