本技术涉及生物工程领域,特别介绍了一种经过工艺优化的CAR-T细胞及其制备方法和应用。该方法包括使用CD3、CD28和CD137三种单克隆抗体来制备CAR-T细胞,旨在提高细胞的疗效和安全性。
背景技术
肿瘤的免疫细胞治疗,是通过人工改造免疫细胞提升免疫细胞对肿瘤细胞的靶向性,提高其对肿瘤细胞的杀伤。嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法被认为是“免疫增强”策略的最典型的例子之一。CAR-T细胞疗法,是通过基因工程技术,人工改造肿瘤患者的T细胞,在体外大量培养后生成肿瘤特异性CAR-T细胞,再将其回输入患者体内,用以攻击癌细胞的一种疗法。CAR-T细胞治疗血液恶性肿瘤已经彻底改变了抗癌治疗。自2010年开始,大量临床研究表明,CAR-T针对于急性淋巴性白血病、弥漫大B淋巴瘤、慢性淋巴性白血病、非霍奇金淋巴瘤等有着良好的治疗效果。目前已有九款CAR-T药物上市,比如吉利德生产的Yescarta和诺华的Kymriah等。
CAR-T细胞有效地治愈了一部分难治性恶性血液病患者,但治疗后疾病复发仍然是主要的障碍之一。CAR-T细胞在体内的增殖和持久性与预后密切相关。越来越多的证据表明,T细胞的低分化状态和内在程序与CAR-T细胞增殖和抗肿瘤能力相关。然而,目前的制备工艺通常采用单克隆抗体CD3和CD28共刺激获取CAR-T细胞,这导致CAR-T细胞线粒体数量减少、衰老和耗竭的表型特征。目前有研究表明,在CAR-T细胞制备过程中,细胞因子(如IL-15、IL-21、TGF-β1)、钙信号通路的抑制剂、NOTCH1激动剂和PI3Kδ/γ抑制剂的添加能够优化CAR-T细胞的表型和功能。通过优化CAR-T细胞的制备工艺,改善CAR-T细胞的质量和代谢适应性,可以增强CAR-T细胞的治疗潜力。本发明采用单克隆抗体CD3、CD28和ICOS共刺激去制备CAR-T细胞。
实现思路