本研究聚焦于生物医学和抗体工程领域,探讨了针对人TIGIT的单克隆抗体TIGIT-M011及其功能性片段。该抗体在免疫治疗中具有潜在的应用价值,为相关疾病的治疗提供了新的策略。
背景技术
免疫治疗为肿瘤治疗提供了新途径,以程序性细胞死亡受体1(PD-1)、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)和淋巴细胞激活基因-3(LAG-3)等免疫检查点抑制剂为代表的抗体药物,已经使多种肿瘤患者受益,但多数患者表现为药物初始无反应或部分应答患者仍然出现肿瘤进展,这可能与存在其他免疫抑制分子的作用及免疫系统的不完全激活有关。筛选并联合新的免疫治疗靶标,优化治疗策略,是当前肿瘤治疗的一大发展趋势。
TIGIT(T cell immunoglobulin and ITIM domains;T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白)也称V-set和跨膜结构域的蛋白3(V-set and transmembrane domain-containing protein 3,VSTM3)、V-set和免疫球蛋白结构域的蛋白9(V-set andimmunoglobulin domain-containingprotein 9,VSIG
9)和WUCAM(Washington Universitycell adhesion molecule),是近年来备受瞩目的新型免疫抑制性受体之一。TIGIT由细胞外IgV结构域、Ⅰ型跨膜蛋白区和基于免疫受体酪氨酸的抑制性基序(immunoreceptortyrosine-based inhibitory motif,ITIM)、免疫球蛋白尾部酪氨酸样基序(immunoglobulin tail tyrosine,ITT)的细胞质尾部组成,表达于活化的T细胞、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)、调节性T细胞(T regulatory,Treg)和CD4辅助性T细胞(Thelper cell,Th)表面。TIGIT有三个配体,分别是CD155(PVR)、CD112(PVRL2,Nectin-2)和CD113(Nectin-3),其中,TIGIT和CD155亲和力最高,其已在树突状细胞(DC)、巨噬细胞以及许多人类癌细胞中鉴定出,并已显示与TIGIT结合后可下调T细胞活化和细胞因子分泌。TIGIT/PVR相互作用的抑制可以介导免疫细胞有效的抗肿瘤活性。DNAM-1(CD226)是在NK细胞、单核细胞和T细胞上发现的活化受体。TIGIT和DNAM-1竞争由肿瘤细胞和抗原提成细胞表达的共享配体CD155和CD112。TIGIT与CD155或CD112的结合会导致免疫抑制,而DNAM-1与相同配体结合则介导免疫激活。因此,TIGIT也是肿瘤免疫治疗的潜在靶点。TIGIT抗体抗肿瘤研究目前处于临床试验阶段,最快的处于III期临床。
现有的TIGIT单抗多通过鼠杂交瘤技术制备。抗体工程技术的进步促进了抗体的制备,并提高了其检测性能。噬菌体抗体库技术可以用于筛选任何抗原特异性的抗体。本研究利用免疫的小鼠噬菌体抗体库筛选抗人TIGIT蛋白的高性能单克隆抗体,与鼠杂交瘤抗体筛选技术相比,能够获得高亲和力抗体。
实现思路