本技术揭示了SELENON基因及其编码蛋白在增强宿主对牛副流感病毒3型(BPIV-3)的抵抗力方面的应用。通过利用SELENON基因及其蛋白,可以有效地调控宿主对BPIV-3的免疫反应,从而提高宿主的抗病毒能力。
背景技术
牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV-3)是一种可以引起牛呼吸系统疾病的重要病原,属于副粘病毒科,呼吸道病毒属,是一种具有囊膜的,不分节段的单股负链RNA病毒,全长约15000bp。BPIV-3引起的牛副流行性感冒(Bovineparainfluenza)是一种接触性、热性、急性的牛呼吸道传染病,以发热,咳嗽,全身衰弱无力,精神沉郁为主要症状,也常表现为呼吸困难,母牛流产或者繁殖障碍。严重的可导致死亡。该病原常和牛呼吸道合胞体病毒(Bovine respiratory syncytial virus,BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea/Mucosaldisease,BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)、巴氏杆菌、曼氏杆菌、支原体等病原混合感染,即牛呼吸道疾病综合征(Bovine respiratory disease complex,BRDC),俗称“运输热”。病牛主要症状有高热,脓性结膜炎,流泪,流鼻涕,频繁咳嗽,呼吸困难,并流出泡沫样口涎。我国目前缺乏有效应对BPIV-3的药物与疫苗,开发能更有效预防和治疗该病的疫苗与药物显得尤为关键。
之前的研究大都采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)文库的方法进行遗传筛选,但该方法存在抑制效率低、脱靶率高等缺点。而CRISPR/Cas9技术作为第三代基因编辑技术,具有经济,操作简单,准确,高效的优点,目前已在猪,人,小鼠,非洲绿猴等多种哺乳动物全基因组筛选中成功应用。
基于此,本发明利用CRISPR/Cas9技术建立牛全基因组细胞突变体库,并将其用于筛选牛副流感病毒3型易感基因,为进一步开发可以更加有效地抵抗BPIV-3的疫苗与药物提供技术支持。通过牛全基因组筛选,本发明发现硒蛋白N(Selenoprotein N,SELENON)基因或其编码蛋白在调控宿主抗BPIV-3感染中发挥重要作用。
实现思路