本研究探讨了Trop2靶向抗体及其抗原结合片段在生物免疫治疗技术领域的应用。该抗体展现出优异的安全性和针对Trop2的治疗效果,可用于开发针对Trop2的靶向治疗药物。
背景技术
针对肿瘤,通过传统的手术切除、化疗、放射线治疗,对正常组织有伤害,具有局限性,效果有限。近年来出现的靶向疗法在细胞分子水平上,针对已经明确的致癌位点来设计相应的治疗药物,药物进入体内会特异地选择致癌位点来相结合发生作用,使肿瘤细胞特异性死亡,不会伤及肿瘤周围的正常组织细胞。
Trop2是由TACSTD2基因编码表达的细胞表面糖蛋白,全称为人滋养细胞表面糖蛋白抗原2(Trophoblast Cell Surface Antigens 2)。Trop2由疏水性前导肽、细胞外结构域、一个跨膜结构域和一个胞质尾部组成,是单次跨膜糖蛋白,大小为35.7KD,是一类钙离子通道信号转化器。Trop2 蛋白N-端为胞外域(Trop2 EC),该胞外域通过一个单向跨膜螺旋(TM)与胞内短尾(Trop2 IC)连接,从而固定于胞膜。其细胞质尾部有高度保守的磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2)结合序列,表明PIP2在Trop2的信号转导中起重要作用。除了PIP2结合基序外,它还含有保守的酪氨酸和丝氨酸磷酸化位点。正常组织中Trop2不表达或者低表达,在乳腺癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌、前列腺癌、宫颈癌、头颈癌和卵巢癌等多种恶性肿瘤中过表达,可促进肿瘤的发生、侵袭、转移和扩散等,在肿瘤生长过程中起着关键作用,所以Trop2被认为是肿瘤免疫候选的一个靶点。
嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor-T cell,CAR-T)T细胞是指经基因修饰后,能以MHC非限制性方式识别特定目的抗原,并且持续活化扩增的T细胞。2012年国际细胞治疗协会年会中指出生物免疫细胞治疗已经成为手术、放疗、化疗外的第四种治疗肿瘤的手段,是一种针对肿瘤细胞表面特异性抗原的新型免疫治疗方法。大量研究表明,CAR-T细胞可以有效的识别肿瘤抗原,引起特异性的抗肿瘤免疫应答,显著改善患者的生存状况。
嵌合抗原受体(CAR)是CAR-T的核心部件,赋予T细胞HLA以非依赖的方式识别肿瘤抗原的能力,这使得经过CAR改造的T细胞相较于天然T细胞表面受体TCR能够识别更广泛的目标。CAR的基础设计中包括一个肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen,TAA)结合区(通常来源于单克隆抗体抗原结合区域的scFv段),一个胞外铰链区,一个跨膜区和一个胞内信号域。目标抗原的选择对于CAR的特异性、有效性以及基因改造T细胞自身的安全性来讲都是关键的决定因素。
单链抗体作为CAR中重要的组成部分,目前传统上采用鼠源抗体,但由于鼠抗的异质性会引起人抗鼠抗体反应(Human anti-mouse antibody reaction,HAMA),因此会导致CAR-T在循环系统中被很快清除,失去疗效。
目前需要开发更多具有良好治疗效果和安全性的Trop2结合分子,以更安全高效地治疗Trop2介导的疾病。
实现思路