本项发明涉及生物医药领域,介绍了一种鲍曼不动杆菌外膜蛋白脂质体疫苗的制备方法及其应用。该疫苗通过基因工程技术高效表达鲍曼不动杆菌外膜蛋白,利用这些蛋白制备脂质体疫苗,旨在提高疫苗的免疫效果和安全性。
背景技术
鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,A.baumannii)是一种革兰氏阴性菌,可以在重症医院患者中引起严重的感染,如呼吸机相关性肺炎、伤口感染和菌血症等,已经成为院内感染的主要病原体之一。由于鲍曼不动杆菌很容易对消毒剂和抗生素耐药,给临床抗感染治疗的带来了巨大挑战,严重威胁着患者的生命安全。疫苗是控制病原体流行感染的最经济、最有效的手段。
目前正在研究的鲍曼不动杆菌疫苗形式多样,涉及灭活全菌疫苗、多糖疫苗、蛋白质疫苗、DNA疫苗、亚单位疫苗、外膜囊泡疫苗以及细菌外膜蛋白复合物(Outer membraneprotein complex,OMC)等多种类型。以上形式的疫苗均能对鲍曼不动杆菌感染动物具有一定的保护作用,但都还处于实验研究阶段,目前尚无鲍曼不动杆菌疫苗进入临床试验。
细菌外膜为双层膜结构,包含多种完整的膜蛋白,这些蛋白具有许多重要功能,包括营养吸收、信号传导、细菌黏附和废物输出等。对于致病菌,外膜蛋白在逃避宿主防御方面也发挥着重要作用。因此,外膜蛋白被认为是鲍曼不动杆菌的主要保护抗原。外膜蛋白复合物含有丰富的抗原,其作为预防性疫苗已被证实具有一定的保护和治疗作用,但是因其脱离“膜环境”,结构无法正确折叠,导致免疫原性低,免疫应答反应弱。而且,外膜蛋白复合物抗原种类过多,有效抗原含量相对较低,内毒素含量过高等因素制约其疫苗研发。
为了获得安全性高、成分明确、纯度较高的单组分外膜蛋白,通过重组DNA技术构建了原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达了鲍曼不动杆菌外膜蛋白,但这些蛋白大多数仍以包涵体形式存在。由于鲍曼不动杆菌致病机制复杂,毒力蛋白和致病因子种类多样,一种外膜蛋白仅可能提供有限的保护作用。以重组金黄色葡萄球菌疫苗为例,该疫苗使用多价策略,包含五种有效抗原,目前已经进入三期临床试验。因此,多组分抗原可能是将来制备鲍曼不动杆菌疫苗的有效策略。
疫苗的设计、研发过程一般需要佐剂辅助抗原,佐剂可能增强免疫原性、改变免疫反应偏向性,对于疫苗的安全性和有效性至关重要。目前鲍曼不动杆菌疫苗研发工作大多集中于外膜蛋白,均无法解决其体外错误折叠的难题,所筛选的抗原无法提供完全保护,也未寻找到合适的疫苗佐剂。
鉴于此,特提出本发明。
实现思路