本技术介绍了一种具有增强胞葬作用的靶向FAP的CAR-巨噬细胞及其制备技术与临床应用。该CAR-巨噬细胞结合了FAP特异性CAR和胞葬作用增强剂Lgmn,旨在提高对纤维化相关疾病的治疗效果。
背景技术
缺血性心脏病和心肌梗死(MI)引发的心力衰竭(HF)仍然是全球死亡的主要原因。心肌梗死后,心脏的不良重塑表现为过度的纤维化,显著损害心脏功能,导致心力衰竭并增加心血管风险。心脏成纤维细胞(CFs)在应对各种心脏损伤时被过度激活,在心脏纤维化和细胞外基质(ECM)沉积中发挥着关键作用。抑制或消除激活的CFs对于减轻心肌梗死后的纤维化和改善心脏功能至关重要,尚未发现有效的治疗方式。
嵌合抗原受体(CAR)细胞治疗通过重新编程免疫细胞以消除特定靶细胞,提供了一种有前景的精准治疗方法。CAR-T靶向去除激活的CFs显示出了潜在的治疗效果,能够减少心脏纤维化并恢复心脏功能。然而,CAR-T细胞在应用过程中可能面临一些局限性,包括组织渗透性差以及严重的副作用,如恶病质、贫血和致命的骨毒性。这些问题限制了CAR-T细胞在实际临床中的广泛应用。与CAR-T细胞治疗相比,嵌合抗原受体-巨噬细胞(CAR-MΦ)具有明显的优势。首先,CAR-MΦs能够更有效地渗透梗死组织,会带来更好的临床效果。其次,CAR-MΦs不会自我增殖,因此显著降低了细胞因子释放综合症的风险。此外,CAR-MΦs的循环时间较短,相较于CAR-T细胞,脱靶毒性更低,从而提高了治疗安全性。
CAR-MΦ疗法在治疗纤维化疾病方面显示出巨大的潜力。例如,靶向uPAR的CAR-MΦ全身注射已被证明可以减轻肝纤维化和肝硬化。此外,移植靶向FAP+
肌成纤维细胞的骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)可在AngII/PE诱导的心脏损伤模型中减少心脏纤维化并改善心脏功能。然而,尽管这些研究取得了令人印象深刻的效果,但体外大量生产纤维化特异性巨噬细胞的复杂过程和高昂成本,仍是CAR-MΦ治疗广泛应用的主要障碍。并且在MI后大量的死亡细胞导致CAR-MΦs面临过重的胞葬负担,具体表现为CAR-MΦs内化和降解功能的不足,从而限制了吞噬溶酶体内货物的持续清除,进而引发次级坏死,阻碍了炎症的溶解,并限制了CAR-MΦs的抗纤维化疗效。
因此,研发一种能够精准治疗、同时还能增强巨噬细胞死亡细胞清除能力的CAR-MΦ,对于炎症解决和心脏纤维化免疫治疗至关重要。
实现思路